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Miltenyi Tumor Dissociation Kit：腫瘤研究的高效組織解離工具

更新時(shí)間：2025-05-02 點(diǎn)擊次數(shù)：920

在腫瘤研究領(lǐng)域，將腫瘤組織解離為單細(xì)胞懸液是進(jìn)行深入細(xì)胞分析、功能研究以及開發(fā)新型治療策略的關(guān)鍵起始步驟。Miltenyi Biotec 推出的 Tumor Dissociation Kit（貨號(hào) 130 - 095 - 929）專為科研人員提供了一種高效、可靠且便捷的腫瘤組織解離解決方案，已成為眾多實(shí)驗(yàn)室的得力助手。

一、產(chǎn)品設(shè)計(jì)與原理

多酶混合體系：該試劑盒包含多種經(jīng)過優(yōu)化配比的酶混合物，這些酶能夠特異性地作用于腫瘤組織中的細(xì)胞外基質(zhì)成分和細(xì)胞間連接蛋白。例如，其中的蛋白酶可水解細(xì)胞間的膠原蛋白和纖維連接蛋白，而核酸酶能降解組織中釋放出的 DNA，防止細(xì)胞聚集，從而實(shí)現(xiàn)溫和且高效的組織解離，減少對(duì)細(xì)胞的損傷，維持細(xì)胞的高活性和表面抗原表位完整性。

配套緩沖液系統(tǒng)：試劑盒中的緩沖液不僅為酶提供了適宜的反應(yīng)環(huán)境，維持 pH 值和離子強(qiáng)度的穩(wěn)定，還能在解離過程中保護(hù)細(xì)胞免受滲透壓變化和氧化應(yīng)激的影響。同時(shí)，緩沖液中的特殊成分有助于去除組織中的雜質(zhì)，提高單細(xì)胞懸液的純度，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供更優(yōu)質(zhì)的樣本。

二、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

廣泛的腫瘤類型適用性：該試劑盒經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，適用于多種原發(fā)性腫瘤和異種移植物的解離，包括但不限于乳腺癌、胰腺癌、結(jié)腸癌、肺癌等常見實(shí)體瘤，以及黑色素瘤等皮膚腫瘤。無論是新鮮獲取的腫瘤組織樣本，還是經(jīng)過短期保存的樣本，都能實(shí)現(xiàn)高效解離，滿足不同腫瘤研究場(chǎng)景的需求。

高細(xì)胞產(chǎn)率與活力：通過優(yōu)化的酶解配方和溫和的解離條件，該試劑盒能夠從腫瘤組織中獲得數(shù)量可觀的單細(xì)胞，顯著提高腫瘤細(xì)胞和腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（TILs）的產(chǎn)率。同時(shí)，細(xì)胞活力得到有效保障，活細(xì)胞比例通?？蛇_(dá) 80% 以上，為后續(xù)的細(xì)胞培養(yǎng)、流式細(xì)胞術(shù)分析、單細(xì)胞測(cè)序等實(shí)驗(yàn)提供充足且高質(zhì)量的細(xì)胞來源。例如，在對(duì)乳腺癌組織的解離實(shí)驗(yàn)中，與傳統(tǒng)手工解離方法相比，使用 Tumor Dissociation Kit 獲得的單細(xì)胞數(shù)量增加了 30%，且細(xì)胞活力更高，為深入研究乳腺癌細(xì)胞的特性和功能提供了更豐富的樣本資源。

出色的抗原表位保留：在腫瘤研究中，準(zhǔn)確識(shí)別和分析細(xì)胞表面抗原對(duì)于鑒定細(xì)胞類型、研究細(xì)胞功能以及開發(fā)免疫治療靶點(diǎn)至關(guān)重要。Miltenyi Tumor Dissociation Kit 在解離過程中能最大限度地保留細(xì)胞表面的抗原表位，確保后續(xù)基于抗體的檢測(cè)和分析方法（如免疫熒光染色、流式細(xì)胞術(shù)分選等）的準(zhǔn)確性和可靠性。這使得科研人員能夠更精準(zhǔn)地對(duì)腫瘤細(xì)胞和腫瘤微環(huán)境中的各類免疫細(xì)胞進(jìn)行分型和功能研究，為揭示腫瘤發(fā)生發(fā)展機(jī)制和開發(fā)創(chuàng)新治療方法提供有力支持。

操作簡(jiǎn)便與節(jié)省時(shí)間：試劑盒的操作流程經(jīng)過精心設(shè)計(jì)，簡(jiǎn)單易懂，即使是經(jīng)驗(yàn)相對(duì)較少的科研人員也能快速上手。與傳統(tǒng)的手工解離方法（如剪刀剪碎組織后長(zhǎng)時(shí)間酶解）相比，使用該試劑盒配合 gentleMACS Octo 等自動(dòng)化組織解離設(shè)備，可將整個(gè)解離過程縮短至 2 - 3 小時(shí)，大大節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間和人力成本。同時(shí)，自動(dòng)化設(shè)備的使用減少了人為操作差異，提高了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可重復(fù)性和穩(wěn)定性，為大規(guī)模腫瘤樣本處理提供了高效解決方案。

三、實(shí)驗(yàn)流程

樣本準(zhǔn)備：新鮮獲取的腫瘤組織應(yīng)盡快置于預(yù)冷的保存液中，若不能立即進(jìn)行解離，可在 4℃短暫保存，但需避免長(zhǎng)時(shí)間放置導(dǎo)致組織自溶。對(duì)于冷凍保存的腫瘤組織，需在 37℃水浴中快速解凍后進(jìn)行后續(xù)處理。

組織切割：將腫瘤組織轉(zhuǎn)移至無菌培養(yǎng)皿中，用無菌手術(shù)刀或剪刀將其切成約 1 - 2mm3 的小塊，盡量保證組織塊大小均勻，以促進(jìn)酶解反應(yīng)的一致性。

酶解反應(yīng)：將切好的組織小塊轉(zhuǎn)移至 gentleMACS C 管中，加入適量的 Tumor Dissociation Kit 中的酶混合液，確保組織塊浸沒。旋緊管蓋后，將 C 管放入 gentleMACS Octo 八通道組織解離器中，選擇針對(duì)人腫瘤組織優(yōu)化的內(nèi)置程序（如 37C_h_TDK_3 等），啟動(dòng)解離程序。設(shè)備會(huì)通過機(jī)械振蕩和酶解的協(xié)同作用，在設(shè)定的時(shí)間和溫度條件下對(duì)組織進(jìn)行高效解離。

細(xì)胞懸液制備：解離程序結(jié)束后，取出 C 管，將細(xì)胞懸液通過 70μm 的 MACS SmartStrainers 細(xì)胞濾網(wǎng)過濾至離心管中，以去除未解離的組織碎片和細(xì)胞團(tuán)塊。隨后，對(duì)濾液進(jìn)行離心，棄去上清液，用適量的緩沖液重懸細(xì)胞沉淀，即可得到單細(xì)胞懸液。

細(xì)胞分析與應(yīng)用：獲得的單細(xì)胞懸液可直接用于多種下游實(shí)驗(yàn)，如通過臺(tái)盼藍(lán)染色法或細(xì)胞計(jì)數(shù)儀檢測(cè)細(xì)胞數(shù)量和活力；利用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)腫瘤細(xì)胞和免疫細(xì)胞進(jìn)行分型和功能分析；進(jìn)行單細(xì)胞測(cè)序，深入探究腫瘤細(xì)胞的基因表達(dá)譜和分子特征；用于細(xì)胞培養(yǎng)，開展腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲等功能實(shí)驗(yàn)；還可用于制備腫瘤類器官，模擬腫瘤的生長(zhǎng)和發(fā)展過程，為腫瘤藥物研發(fā)和個(gè)性化治療提供更有效的模型。

四、應(yīng)用案例

腫瘤免疫研究：在一項(xiàng)關(guān)于腫瘤免疫逃逸機(jī)制的研究中，科研人員使用 Miltenyi Tumor Dissociation Kit 從肺癌患者的腫瘤組織中獲得高純度的腫瘤細(xì)胞和腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞。通過流式細(xì)胞術(shù)分析，發(fā)現(xiàn)腫瘤微環(huán)境中存在大量免疫抑制細(xì)胞，且這些細(xì)胞表面的某些免疫檢查點(diǎn)分子表達(dá)上調(diào)。進(jìn)一步對(duì)這些細(xì)胞進(jìn)行單細(xì)胞測(cè)序，揭示了腫瘤細(xì)胞與免疫細(xì)胞之間復(fù)雜的相互作用網(wǎng)絡(luò)，為開發(fā)針對(duì)肺癌的免疫治療新策略提供了重要理論依據(jù)。

腫瘤藥物研發(fā)：某制藥公司在開發(fā)新型抗腫瘤藥物時(shí)，利用該試劑盒將人源腫瘤異種移植物（PDX）模型的腫瘤組織解離為單細(xì)胞懸液，然后將這些細(xì)胞接種到 96 孔板中進(jìn)行藥物敏感性測(cè)試。由于使用 Tumor Dissociation Kit 獲得的細(xì)胞活性高且表型穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果能夠準(zhǔn)確反映藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制效果，大大提高了藥物篩選的效率和準(zhǔn)確性，加速了新型抗腫瘤藥物的研發(fā)進(jìn)程。

腫瘤單細(xì)胞測(cè)序：在一項(xiàng)旨在繪制腫瘤單細(xì)胞圖譜的大型研究項(xiàng)目中，研究團(tuán)隊(duì)使用 Miltenyi Tumor Dissociation Kit 對(duì)來自不同腫瘤類型和不同分期的大量腫瘤組織樣本進(jìn)行解離，成功獲得了高質(zhì)量的單細(xì)胞懸液。通過單細(xì)胞 RNA 測(cè)序技術(shù)，他們繪制了詳細(xì)的腫瘤單細(xì)胞圖譜，發(fā)現(xiàn)了一些新的腫瘤細(xì)胞亞群及其特異性標(biāo)志物，為深入理解腫瘤的異質(zhì)性和精準(zhǔn)治療提供了豐富的數(shù)據(jù)資源。

Miltenyi Tumor Dissociation Kit 憑借其的設(shè)計(jì)、顯著的優(yōu)勢(shì)以及廣泛的應(yīng)用，為腫瘤研究領(lǐng)域的科研人員提供了一種高效、可靠的組織解離解決方案。無論是基礎(chǔ)研究還是轉(zhuǎn)化應(yīng)用，該試劑盒都能助力科研人員突破實(shí)驗(yàn)瓶頸，推動(dòng)腫瘤研究取得新的進(jìn)展，是腫瘤研究實(shí)驗(yàn)室的重要工具。