不同類(lèi)型的指示劑在SDS-PAGE電泳中的遷移情況有何差異？

• 溴酚藍(lán)

• 遷移速度：溴酚藍(lán)的分子量較小，在 SDS - PAGE 電泳中遷移速度較快。通常在 10% - 12% 的聚丙烯酰胺凝膠中，它的遷移位置大致相當(dāng)于 3 - 5 kDa 的蛋白質(zhì)。

• 顏色變化：溴酚藍(lán)在堿性條件下呈藍(lán)色，在酸性條件下呈黃色。在電泳過(guò)程中，由于凝膠環(huán)境通常為堿性，所以它一直保持藍(lán)色，便于觀(guān)察電泳的進(jìn)程。

• 二甲苯青 FF

• 遷移速度：二甲苯青 FF 的分子量比溴酚藍(lán)大，遷移速度較慢。在相同濃度的聚丙烯酰胺凝膠中，它的遷移位置大約相當(dāng)于 40 - 50 kDa 的蛋白質(zhì)。

• 顏色變化：二甲苯青 FF 通常呈現(xiàn)藍(lán)色，在電泳過(guò)程中顏色相對(duì)穩(wěn)定，也是通過(guò)其在凝膠中的位置來(lái)指示電泳的進(jìn)度。

• 銀染指示劑

• 遷移速度：銀染指示劑并非傳統(tǒng)意義上在電泳過(guò)程中實(shí)時(shí)觀(guān)察的指示劑，而是用于在銀染步驟中幫助判斷染色和脫色程度。它一般與蛋白質(zhì)樣品一起電泳，但在電泳過(guò)程中其遷移情況并不作為實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)指標(biāo)。

• 顏色變化：在銀染過(guò)程中，銀染指示劑會(huì)與銀離子發(fā)生反應(yīng)，通常會(huì)先于蛋白質(zhì)條帶顯色，幫助實(shí)驗(yàn)者判斷染色時(shí)間。在脫色過(guò)程中，它也會(huì)先于蛋白質(zhì)條帶褪色，可作為脫色終止的參考，其顏色變化從深色（如棕色或黑色）逐漸變?yōu)闊o(wú)色。